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卵白质和糖学技能接头版

2018-01-10

给各人点资料参考一下!

生物素(biontin,B)遍及漫衍于动、植物组织中,Cadmium selenide powder,常从含量较高的卵黄和肝组织中提取,分子量244.31kD.生物素分子有两个环状布局(图 11-1),个中Ⅰ环为咪唑酮环,是与亲和素团结的主要郎部位;II环为噻吩环,C2上有一戊酸侧链,其结尾羧基是团结抗体和其他生物大分子的惟一布局,经化学修饰后,生物素可成为带有多种活性基团的衍生物——活化生物素
①标志卵白质氨基的活化生物素 ②标志卵白质醛基的活化生物素 ③标志卵白质巯基的活化生物素

1.标志卵白质氨基的活化生物素
此种活化生物素的制备要领是将生物素与N-羟基丁二酰胺在碳二亚胺的浸染下举办缩和,镍钛合金粉,生成生物索素N-羟基丁二酰亚胺酯(biotiny-N-hydroxy-succinimide,BNHS)。BNHS分子酯健中的-C=O基团可与卵白质分于中赖氨酸的氨基形成肽键,从而使卵白质标志上生物素。若卵白质含赖氨酸残基多,且等电点PI>6时,标志结果好。因此,BNHS合用于反抗体和中性或偏碱性抗原的生物素标志。

2.标志卵白质醛基的活化生物素
用于此类标志的活化生物素有两种:生物衰酰肼(biotin hydrazine,BHZ)和肼化生物胞素(biocyin hydrazine,BCHZ)。BHZ是水合肼(hydraine hydrate)与生物素的合成物,主要用于偏酸性糖卵白的生物素标志。也可在BHZ侧链上添加一个赖氨酸基团作为连结臂, boron powderboron powder,淘汰标志后的空间位阻,使活化后的生物素能更好地与亲和素团结。
生物胞素(biocytin)是生物素通过-C=O基与赖氨酸的ε-氨基毗连而成的化合物,它与无水肼回响后形成的肼化物即为肼化生物胞素(biocytin hydrazine,BCHZ)。BCHZ除可与卵白质的醛基团结外,它还与BNHS沟通,能与卵白质的氨基团结,因此其合用范畴较BHZ宽。

3.标志卵白质巯基的活化生物素
3-(N-马来酰亚胺-丙酰)-生物胞素[3-(N-maleimido-propiny)-biocytin,MPB]是能特异地与卵白质巯基团结的活化生物素试剂。它是用氯化生物胞素与3-(N-马来酰亚胺-丙酰)-N-BNHS在二甲基甲酰胺(DMF)溶液中回响后制得的。
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